脱氧胆酸柠檬酸盐琼脂 (DCA Agar)

用途

DCA琼脂最主要的用途是选择性地培养和分离肠道病原菌,例如沙门氏菌 (Salmonella) 和志贺氏菌 (Shigella)。由于其配方中含有脱氧胆酸钠和柠檬酸盐,可以抑制许多非肠道细菌的生长,从而有利于病原菌的生长和分离。此外,DCA琼脂也被用于食物、水和其他环境样本的细菌学检测。

成分与原理

DCA琼脂的成分包括:蛋白胨、酵母提取物、乳糖、蔗糖、柠檬酸盐、脱氧胆酸钠、枸橼酸铁铵、中性红指示剂和琼脂。蛋白胨和酵母提取物提供细菌生长所需的营养物质,而乳糖和蔗糖是可发酵的碳源。脱氧胆酸钠和柠檬酸盐是选择性抑制剂,能够抑制革兰氏阳性菌和一些革兰氏阴性菌的生长。枸橼酸铁铵提供硫化氢的指示剂,中性红指示剂则用于检测乳糖发酵情况。

当细菌在DCA琼脂上生长时,可以根据其对乳糖和蔗糖的发酵能力以及硫化氢的产生情况进行初步的鉴定。例如,沙门氏菌通常不发酵乳糖和蔗糖,产生无色或半透明的菌落,并在培养基中产生黑色硫化氢。志贺氏菌也不发酵乳糖和蔗糖,产生无色或半透明的菌落。

操作流程

DCA琼脂的使用流程通常包括以下几个步骤:

  • 准备:将DCA琼脂制备成培养皿或斜面。
  • 接种:使用无菌技术将待测样本接种到DCA琼脂上。
  • 培养:将接种后的培养皿在37°C下培养18-24小时。
  • 观察:观察菌落的形态、颜色和对培养基的影响(如是否发酵乳糖,是否产生硫化氢)。
  • 鉴定:根据菌落的形态和生化特性进行初步的鉴定。

局限性

尽管DCA琼脂在分离肠道病原菌方面非常有用,但它也存在一些局限性。它不能完全抑制所有非目标细菌的生长,一些非病原菌可能会在培养基上生长。此外,DCA琼脂并不能直接鉴定出特定的病原菌,需要进一步的生化试验或血清学试验才能确认。对于一些难以培养或生长缓慢的病原菌,如耶尔森菌,DCA琼脂可能不适用。

结论

DCA琼脂是一种重要的细菌培养基,在临床微生物学和食品安全检测中起着关键作用。它通过选择性抑制,有利于分离和鉴定肠道病原菌。尽管存在一些局限性,但其在病原菌检测中的应用仍然非常广泛。

参考资料