耶稣的告别与应许
在这一章中，耶稣开始向门徒告别，预示他即将离开世界。耶稣预言了圣灵的到来，圣灵将会成为真理的向导，安慰门徒，并指引他们进入一切真理。 他解释说，他的离去对门徒来说并非坏事，因为他若不去，保惠师（圣灵）就不会来。耶稣承诺会将圣灵差来，圣灵会使门徒想起耶稣所说的一切，并继续教导他们。
圣灵的工作与世人的不信
耶稣详细描述了圣灵在世上的工作。圣灵将会使世人知罪，指证罪、义、和审判。耶稣解释说，世人会因为不信耶稣而有罪；耶稣是义的，因为他回到父那里去；审判已经临到这世界，因为世界的王已经被定罪。耶稣还提到，门徒会受到世界的逼迫，但他鼓励他们要刚强壮胆，因为他已经胜了世界。
门徒的悲伤与喜乐
耶稣预言门徒会因他的离去而感到悲伤，但他们的悲伤终将变为喜乐。他用“生产的妇人”的比喻来解释，妇人生产时感到痛苦，但生下孩子后，就忘记了苦楚，因着喜悦世上生了一个人。耶稣应许，当他复活后，门徒会再次见到他，他们的喜乐将无人能夺去。耶稣鼓励门徒要靠着他，在世上要忍受苦难，但最终会在他里面得着平安。
祷告的应许
耶稣还强调了祷告的重要性，并应许门徒奉他的名向父祈求，就必得着。他解释说，之前他们没有奉他的名求什么，但现在要祈求，并且他们的喜乐可以满足。耶稣告诉门徒，他来世上是要向他们明说，现在他要回到父那里去。
结论
约翰福音第十六章是耶稣在受难前对门徒的重要教诲，核心主题围绕着圣灵的到来、耶稣的离去以及门徒的安慰。这一章预示了圣灵的工作，耶稣的复活以及门徒未来的喜乐。它鼓励信徒在面对挑战时要依靠圣灵，相信耶稣，并且在祷告中寻求上帝。